CO2三氣細胞培養箱是在普通CO2培養箱基礎上，增加了氧氣（O2）和氮氣（N2）精確控制能力的細胞培養設備，可同時控制溫度、濕度、CO2和O2（或N2）等關鍵參數，以模擬細胞、組織在體內不同氧分壓環境下的生長條件，廣泛用于干細胞研究、腫瘤缺氧模型、體外受精（IVF）、組織工程與藥物篩選等領域。

一、“三氣”的含義與控制原理

所謂“三氣”，指的是O2、N2、CO2三種氣體。箱體內只含有這三種成分，其比例總和為100%，因此只要精確控制其中任意兩種，就能確定第三種含量，從而實現對三氣的精確調控。通常做法是：

當目標氧濃度低于正常空氣水平（<約19.8%）時，通過通入N2和CO2來稀釋空氣中O2，使箱內O2降至設定值；

當目標氧濃度高于正常（如>23%）時，則通過額外通入O2和CO2，使箱內O2升至設定值。

氣體檢測方面：CO2濃度多采用超聲或紅外傳感器，通過聲波傳播速度或紅外吸收變化來計算濃度，響應速度快、無機械磨損；O2檢測常用電化學或氧化鋯（ZrO2）傳感器，線性度好，壽命長。

二、結構與系統組成

三氣培養箱通常包括以下幾大模塊：

箱體與內膽：多采用鏡面不銹鋼內膽、鋼板噴塑外殼，易清潔、耐腐蝕；隔板可調，便于不同規格培養皿或培養瓶的擺放。

溫控系統：常用六面加熱（如水套或氣套加熱），配合PID算法和PT1000等高精度溫度傳感器，實現對37℃等培養溫度的穩定控制（波動度可達±0.1℃級別），單獨門溫設計可減少開門對箱內溫度的影響。

加濕系統：一般采用水盤自然蒸發方式，使相對濕度達到約95%，減少培養基蒸發和pH漂移。

氣體控制與過濾系統：通過電磁閥、質量流量計與高精度傳感器組成閉環控制；進風通常經過HEPA高效過濾，保證空氣無菌；有的機型還帶有紫外燈滅菌，進一步提升無菌水平。

循環與恢復系統：微風循環使箱內空氣分布均勻，縮短開門后溫度、濕度與氣體濃度的恢復時間，提高環境穩定性。

三、應用與研究意義

與普通CO2培養箱相比，三氣培養箱的核心價值在于“對氧環境的精細控制”：

干細胞與分化研究：早期胚胎、干細胞對氧分壓高度敏感，低氧環境有助于維持多能性或定向分化。

腫瘤缺氧模型：實體瘤內部常處于低氧甚至缺氧狀態，三氣培養箱可在體外模擬這一微環境，用于研究腫瘤侵襲、轉移與耐藥機制。

組織工程與再生醫學：構建大塊組織或器官時，通過梯度氧控制促進細胞增殖與基質形成。

體外受精與胚胎培養：調節培養箱內的O2和CO2，以更好模擬體內輸卵管與子宮環境，提高胚胎發育質量。

藥物篩選與毒理學：在高氧或低氧條件下測試候選化合物對細胞存活、代謝與信號通路的影響。

四、操作要點與注意事項

為確保培養穩定與安全：

參數設置要合理：溫度通常設定為37℃、CO2為5%、O2則視實驗需要，常見范圍為1%–20%，不宜長時間處于氧環境以避免設備負擔過大。

定期校準傳感器：CO2、O2和溫度傳感器應按廠家建議定期校準，避免濃度漂移影響細胞pH和代謝。

水源與清潔：加水使用蒸餾水或去離子水，定期清潔水盤與內膽，防止細菌或真菌滋生。

合理開門：盡量縮短開門時間，避免頻繁開門引起環境波動，部分機型開門時會自動關閉進氣和循環以減少氣體損耗。

記錄與追溯：利用數據記錄與遠程監控功能保存溫度、濕度和氣體濃度歷史數據，便于實驗回溯與故障診斷。

總之，CO2三氣細胞培養箱通過在“溫度—濕度—CO2—O2”四維空間中的精準控制，為體外細胞和組織提供了一個高度仿真體內環境的“微宇宙”，是現代細胞生物學、轉化醫學和再生醫學研究的平臺型設備。